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关于YPD Plus Medium

关于YPD Plus Medium:

    酵母杂交文库筛库对于感受态细胞的转化效率要求比较高。一般有以下几个方法来提高转化效率。

1.使用变性的Carrier DNA作为担体DNA。

2.选用生长状态良好的酵母菌并适当增加菌种密度。

3.提高质粒的纯度浓度。tyc234cc太阳在线玩游戏的 YPD Plus(PT1004)在此基础上,增加转化后活化复苏步骤,可以将转化效率有效提高约50%-100%。


使用方法:


1.5mL体系:


1. 常规LiAc转化方法完成转化。适用于本公司酿酒酵母感受态制备及转化试剂盒(PT1183)。

2. 转化产物1000g 离心弃上清,用1 mL YPD Plus悬浮沉淀,30℃摇床震荡培养60min。

3. 1000g 离心5min。加入1mL无菌0.9%NaCl重悬菌体。

4. 分别稀释10倍,100倍后涂布于相应的缺陷型培养基上。

5. 30℃恒温培养3-5天。


15mL体系:


1. 常规LiAc转化方法完成转化。适用于本公司酿酒酵母感受态制备及转化试剂盒(PT1183


2. 转化产物1000g 离心弃上清,用3 mL YPD Plus悬浮沉淀,30℃摇床震荡培养90min。


3. 1000g 离心5min。加入15mL无菌0.9%NaCl重悬菌体。


4. 分别稀释10倍,100倍后涂布于相应的缺陷型培养基上。


5. 30℃恒温培养3-5天。


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