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新服务“全能型酵母杂交验证”上线DUALhunter系统就是在DUALmembrane系统的基础上,做了适当的修改,即通过一个小的膜蛋白(酵母ER蛋白Ost4)将胞浆蛋白(或核蛋白)固定到胞膜上,便于检测。 首先,将Bait蛋白(Bait-Cub-LexA-VP16)的N端和一个小膜锚蛋白(Ost4)融合在一起,形成融合蛋白(Ost4-Bait-Cub-LexA-VP16)(见图E);接着,将靶蛋白融合到泛素NubG部分的N端;如果Bait和Prey存在相互作用,促使泛素的NubG和Cub两个部分靠近,,从而分离的泛素得到重构,被UBPs识别,导致LexA-VP16的解离,进入核内,从而激活报告基因的转录。 |